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提取DNA的方法<-->生物体内DNA分子复制的条件
DNA提取的实验设计 〖实验流程〗 1、实验材料的选取 选用DNA含量相对较高的生物组织。 2、破碎细胞,获取含DNA的滤液 (1)动物细胞的破碎——以鸡血为例 在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌,过滤后收集滤液即可。 (2)植物细胞的破碎——以洋葱为例 先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。 3、去除滤液中的杂质 (1)方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质。 (2)方案二:直接向滤液中加入嫩肉粉,反应10min~15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。 (3)方案三:将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温10min~15min,注意严格控制温度范围,使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性,可以将DNA与蛋白质分离。 4、DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的酒精这一原理,可从冷却的酒精中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状。 5、DNA的鉴定 将呈丝状的DNA溶解于5mL物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中,再加入4mL的二苯胺试剂,沸水浴加热5min,冷却后观察溶液的颜色。注意要同时设置对照实验。 〖操作提示〗 (1)以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固。 (2)加入洗涤剂后,动作要轻缓柔和,否则容易产生大量的泡沫。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 (3)二苯胺试剂要现配现用。
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