面向未来,活在当下! 收藏夹
我的
首页 > 生物 > 基础知识 > 生物技术实践

DNA提取的实验设计

DNA提取的实验设计
〖实验流程〗
1、实验材料的选取
  选用DNA含量相对较的生物组织。
2、破碎细胞,获取含DNA的滤液
(1)动物细胞的破碎——以鸡血为例
  在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒搅拌过滤后收集滤液即可。
(2)植物细胞的破碎——以洋葱为例
  先将洋葱切碎,然后加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分搅拌和研磨过滤后收集研磨液。
3、去除滤液中的杂质
(1)方案一:通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质
(2)方案二:直接向滤液中加入嫩肉粉,反应10min~15min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
(3)方案三:将滤液放在60~75℃的恒温水浴箱中保温10min~15min,注意严格控制温度范围,使蛋白质沉淀析出而DNA分子还未变性,可以将DNA与蛋白质分离。
4、DNA的进一步提纯
  利用DNA不溶于冷却的酒精这一原理,可从冷却的酒精中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为白色丝状
5、DNA的鉴定
  将呈丝状的DNA溶解于5mL物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液中,再加入4mL的二苯胺试剂,沸水浴加热5min,冷却后观察溶液的颜色。注意要同时设置对照实验。
〖操作提示〗
(1)以血液为实验材料时,每100mL血液中需要加入3g柠檬酸钠,防止血液凝固
(2)加入洗涤剂后,动作要轻缓柔和,否则容易产生大量的泡沫。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀
(3)二苯胺试剂要现配现用
来顶一下
返回首页
返回首页
收藏知识
收藏知识
相关知识
    无相关信息
发表笔记 共有条笔记
验证码:
学习笔记(共有 0 条)
开心教练从2004年开始自费开设这个网站. 为了可以持续免费提供这些内容, 并且没有广告干扰,请大家随意打赏,谢谢!,
(微信中可直接长按微信打赏二维码。)
微信 支付宝