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提取生物大分子的基本思路<-->DNA提取的实验设计
提取DNA的方法 〖概念〗 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。 〖原理〗 1、分离: DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分离目的。 2、提纯: (1)DNA不溶于酒精,但是某些蛋白质则可溶于其中。 (2)蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有影响。 (3)大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温而发生变性,而DNA在80℃以上才会变性。 (4)洗涤剂能够瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。 利用以上原理可以将DNA与蛋白质进一步分离。 3、鉴定:在沸水浴的条件下,DNA被二苯胺染成蓝色。 〖步骤〗
1、防止血凝。 2、加速血细胞破裂。 3、溶解DNA。 4、使2 mol/L的NaCl溶液稀释至0.14 mol/L,促DNA最大限度地析出。 5、使含DNA的黏稠物被留在纱布上。 6、使含DNA的黏稠物尽可能多地溶于溶液中。 7、除去含DNA的滤液中的杂质。 8、提取DNA。 9、A:出现蓝色。B:无变化
提取生物大分子的基本思路<-->DNA提取的实验设计
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